抗體亞型鑒定
亞型指的是相同的構成方式，但是空間結構不同的蛋白質結構?？贵w亞型，指的是在機體內產生的“Y”構型的免 疫球蛋白（Ig），基于小分子多肽結構上的差異，可以進一步的進行細分。
抗體亞型
重鏈
抗體以一個或者多個“Y”字形單體存在,每個“Y”字形單體由 4 條多肽鏈組成,包含兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈。 通常，抗體的種類由重鏈決定。例如哺乳動物 Ig 的重鏈一共有五種,分別用希臘字母α、δ、ε、γ和 μ 來命名,相對應組成的抗體就稱為 IgA、IgD、IgE、IgG 和 IgM。其中，人的γ可以進一步細分為γ1、γ2、γ3、γ4 等亞類，分別對應 IgG1, IgG2, IgG3 和 IgG4 四個亞型，小鼠γ可以進一步細分為γ1、γ2a、γ2b、γ3 等亞類，分別對應 IgG1, IgG2a, IgG2b 和 IgG3 四個亞型。
輕鏈
哺乳動物有兩種輕鏈：λ型和κ型。出于科研的需要，人們也會對輕鏈的亞型進行鑒定。
類/亞類 | 重鏈 | 輕鏈 | 分子量（kDa） | 結構 | 功能 |
IgA1
| α1α2
| λ或κ | 150-600 | 單體-四聚體
| IgA 有血清型和分泌型，血清型 IgA 不顯示重要的免疫功能，分泌型 IgA 存在于分泌液中，如唾液、淚液、初乳、鼻和支氣管分泌液等，是機體粘膜局部抗感染免疫的主要抗體。 功能不詳； |
IgD | δ | λ或κ | 150 | 單體 | 與 IgM 共同存在于 B 細胞發育的各個階段；大部分與 B 細胞結合。 |
IgE | ε | λ或κ | 190 | 單體 | 結合變應原引發巨細胞釋放組胺，可以對抗寄生蟲感染。 |
IgG1 IgG2 IgG3 IgG4 | γ1 γ2 λ γ3 γ4 | λ或κ | 150 | 單體 | 血清中最主要的免疫球蛋白。在免疫反應中最主要的抵 御病原的侵襲的抗體為 IgG; 可通過胎盤。 |
IgM | μ | λ或κ | 900 | 五聚體 | 最早產生的反應性抗體，在 B 細胞表面表達，分泌型有很高的親和力。在 B 細胞介導的免疫反應早期，產生足夠的 IgG 之前發揮消除病原菌的作用。 |
表 1：不同亞型抗體的結構與功能
抗體亞型鑒定
抗體亞型鑒定的原理是利用酶聯免疫吸附實驗（ELISA），測定待測抗體與不同亞 型特異性的抗體的結合情況，找出可以與待測抗體特異性結合的抗體，由于與待測抗體結合的抗體的特異性都是已知的，依據結合抗體的特異性可以得出待測抗體的亞型。以小鼠抗體亞型的測定為例，利用 ELISA 測定待測抗體與針對小鼠 IgG1、IgG2A、 IgG2B、 IgG3、IgM、λ、κ有特異性的抗體的結合情況。如果待測抗體抗體可以與針對小鼠 IgG1 的特異性抗體結合（通過肉眼觀察顏色深淺或通過測OD 值判斷），則該抗體的亞型為 IgG1。以此類推，也可以測出輕鏈的亞型。
鑒定方法
目前比較常用的方法是利用試劑盒進行抗體亞型的鑒定，按照試劑盒說明書進行操作，便可以直觀的讀出抗體的亞 型。
利用試劑盒鑒定抗體亞型常見問題與解決方法：
樣本中抗體濃度過高再將樣本 1:2-1:10 稀釋
常見問題 | 可能原因 | 解決方案 |
多種重鏈結果 | 腹水中有雜抗體 雜交瘤細胞中含有多種細胞系 | 將腹水樣本至少 1:100000 稀釋 |
結果難以判定 | 多種重鏈或輕鏈結果 | 再將樣本 1:4 或 1:8 稀釋后重新檢測 |
顯色較慢或顏色較弱 | 樣本中抗體濃度低 | 減少稀釋倍數；延長顯色時間 |
表 2：常見問題與解決方案
抗體亞型鑒定的意義
不同亞型的抗體在結構上有所區別，其免疫源性與在體內發揮的作用存在差異，對抗體進行進一步的細分，并進行 抗體亞型鑒定，對于疾病作用機理的研究、抗體藥物的開發有重要意義。
相關服務
抗體亞型鑒定服務:IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3，IgM，IgA 的鑒定。
